2020年專題區
核酸檢測是極其靈敏且精密的實驗,核酸檢測實驗室有特殊的環境要求,不是隨便開辟個地方就能檢測的。為什麼現在要建立專門的方艙實驗室才能進行核酸檢測,就是這個道理。
那麼,核酸檢測在實驗室內是如何進行的?這個過程大致可分為這樣幾個步驟:檢測前的準備工作——核對樣本信息——樣本滅活——開蓋加樣和核酸提取——PCR反應體係配製——核酸擴增檢測——檢測完成——高壓滅菌。
檢測前
打開樣本前,檢測人員需穿戴好個人防護裝備,如防護服、口罩、護目鏡、麵屏、雙層醫用乳膠手套、防水靴套,每個步驟都不能出錯。
檢測中
1.核對樣本信息。
樣本都是在嚴密包裝下被護送到實驗室的,需要實驗室簽收,錄入信息係統。這個步驟需要一個一個拆包裝,而且是雙層密封包裝,每一個都要消毒處理,做好生物安全防護。消毒完畢後對被檢測樣本的姓名、年齡、性別等信息進行核對。然後將樣本的信息錄入係統,對接健康碼。
這期間,全手工,不比取樣快多少,特別是麵對海量樣本,必須保證零錯誤,不能出現人數和樣本數不一致、張冠李戴等錯誤。
2.將樣本放在水浴箱中進行半個小時56℃的高溫滅活,使病毒蛋白失去生理活性,在不影響病毒蛋白基因序列的前提下,使病毒失去感染、致病和繁殖能力,保證檢測過程的安全性。
3.實驗員拿到滅活後的樣本時,第一步是進行振蕩,盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養基溶液中。第二步是進行5分鍾的沉澱。第三步進行開蓋加樣,這一步須人工操作,並且需要兩人高度配合完成。一人擰開樣本管的蓋子,另一人拿微量移液器在樣本管中吸取微量溶液,放到另一個提取管裏,再擰上管蓋。
核酸提取可以使用儀器輔助,但由於比對需要,往往要加以人工操作,需要反複進行離心、加試劑、洗滌等10多個步驟。其中,需要打開管蓋的操作就達7次以上,完成一例人工核酸提取至少需要50分鍾。
4.走出核心實驗區,開始進行PCR反應體係配製,將提取的病毒核酸加入到核酸擴增檢測試劑中。
5.將配製好的PCR反應物放置在熒光定量PCR儀上。在電腦上設置PCR反應條件,運行儀器,開始核酸擴增檢測。
這個過程需要1~2個小時,而且儀器一旦啟動擴增程序是不能停下來中途添加新的樣本的,必須要等這一批的結果擴增完成後,才能進行下一批樣本的擴增。所以,這也是為什麼核酸檢測不能做到隨到隨測的原因之一。
檢測後
檢測人員需要實時關注檢測情況,約1.5小時後,核酸擴增完成,進行檢測結果判讀。然後工作人員將結果上傳信息係統,群眾就可以查詢結果了。至此,曆經大概4小時,核酸檢測整個流程完成。
最後,也是非常重要的一步就是對汙染物的高壓滅菌處理。實驗過程產生的汙染物通過高壓滅菌後,按普通醫療垃圾處理。
可以說,核酸檢測的過程是一個非常複雜的過程,需要實驗人員付出艱苦的勞動,同時還需要保證實驗的安全性、科學性,這樣才能得出準確的結果。
(河南省衛生健康委、河南省疾病預防控製中心供稿)
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核酸檢測是極其靈敏且精密的實驗,核酸檢測實驗室有特殊的環境要求,不是隨便開辟個地方就能檢測的。為什麼現在要建立專門的方艙實驗室才能進行核酸檢測,就是這個道理。
那麼,核酸檢測在實驗室內是如何進行的?這個過程大致可分為這樣幾個步驟:檢測前的準備工作——核對樣本信息——樣本滅活——開蓋加樣和核酸提取——PCR反應體係配製——核酸擴增檢測——檢測完成——高壓滅菌。
檢測前
打開樣本前,檢測人員需穿戴好個人防護裝備,如防護服、口罩、護目鏡、麵屏、雙層醫用乳膠手套、防水靴套,每個步驟都不能出錯。
檢測中
1.核對樣本信息。
樣本都是在嚴密包裝下被護送到實驗室的,需要實驗室簽收,錄入信息係統。這個步驟需要一個一個拆包裝,而且是雙層密封包裝,每一個都要消毒處理,做好生物安全防護。消毒完畢後對被檢測樣本的姓名、年齡、性別等信息進行核對。然後將樣本的信息錄入係統,對接健康碼。
這期間,全手工,不比取樣快多少,特別是麵對海量樣本,必須保證零錯誤,不能出現人數和樣本數不一致、張冠李戴等錯誤。
2.將樣本放在水浴箱中進行半個小時56℃的高溫滅活,使病毒蛋白失去生理活性,在不影響病毒蛋白基因序列的前提下,使病毒失去感染、致病和繁殖能力,保證檢測過程的安全性。
3.實驗員拿到滅活後的樣本時,第一步是進行振蕩,盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養基溶液中。第二步是進行5分鍾的沉澱。第三步進行開蓋加樣,這一步須人工操作,並且需要兩人高度配合完成。一人擰開樣本管的蓋子,另一人拿微量移液器在樣本管中吸取微量溶液,放到另一個提取管裏,再擰上管蓋。
核酸提取可以使用儀器輔助,但由於比對需要,往往要加以人工操作,需要反複進行離心、加試劑、洗滌等10多個步驟。其中,需要打開管蓋的操作就達7次以上,完成一例人工核酸提取至少需要50分鍾。
4.走出核心實驗區,開始進行PCR反應體係配製,將提取的病毒核酸加入到核酸擴增檢測試劑中。
5.將配製好的PCR反應物放置在熒光定量PCR儀上。在電腦上設置PCR反應條件,運行儀器,開始核酸擴增檢測。
這個過程需要1~2個小時,而且儀器一旦啟動擴增程序是不能停下來中途添加新的樣本的,必須要等這一批的結果擴增完成後,才能進行下一批樣本的擴增。所以,這也是為什麼核酸檢測不能做到隨到隨測的原因之一。
檢測後
檢測人員需要實時關注檢測情況,約1.5小時後,核酸擴增完成,進行檢測結果判讀。然後工作人員將結果上傳信息係統,群眾就可以查詢結果了。至此,曆經大概4小時,核酸檢測整個流程完成。
最後,也是非常重要的一步就是對汙染物的高壓滅菌處理。實驗過程產生的汙染物通過高壓滅菌後,按普通醫療垃圾處理。
可以說,核酸檢測的過程是一個非常複雜的過程,需要實驗人員付出艱苦的勞動,同時還需要保證實驗的安全性、科學性,這樣才能得出準確的結果。
(河南省衛生健康委、河南省疾病預防控製中心供稿)
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